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發(fā)布時(shí)間: 2019-09-10
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3.1 反膠束革取和膠束催化
表面活性劑在非極性溶劑如某些有機(jī)溶劑中會(huì)形成疏水基向外、親水基向內(nèi)的具有極性內(nèi)核的多分子聚集體。由于此時(shí)表面活性劑的排列方向與一般的正向膠束相反,所以被稱為反向膠束<簡稱反膠束>。反膠束的極性內(nèi)核可以溶解少量水而形成微型水池,蛋白質(zhì)、核酸和氨基酸等生物質(zhì)便可溶解其中。同時(shí),由于反膠束的屏蔽作用,這些生物質(zhì)不與有機(jī)溶劑直接接觸,起到保護(hù)生物質(zhì)活性的作用,從而實(shí)現(xiàn)了生物質(zhì)的溶解和革取 不同的表面活性劑形成的反膠束的性質(zhì)也有差異,其中研究得較多的是AOT[二-<2-乙基己基>丁二酸醋磺酸鈉]/異辛烷體系[4] 反膠束革取具有操作過程簡單~易于放大等液-液革取過程的優(yōu)點(diǎn),同時(shí)具有選擇性高~能有效防止生物大分子失活和變性等優(yōu)良特性,在生物分離領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用反膠束革取蛋白質(zhì)主要有:(1)同時(shí)提取蛋白質(zhì)和油脂;(2)分離蛋白質(zhì)混合物;(3)從發(fā)酵液中分離和提純酶。
如果對(duì)膠束進(jìn)行一些特殊的修飾,有可能賦予膠束或反膠束革取的更多優(yōu)良性能。在體系中添加具有親合特性的助劑,由于它的親合配基可與目標(biāo)蛋白質(zhì)特異結(jié)合,因此極少量親合配基的加入就會(huì)使革取目標(biāo)蛋白的選擇性大大提高
膠束催化就是在膠束中進(jìn)行酶催化反應(yīng)。膠束催化中使用的表面活性劑為溫和表面活性劑,以防止酶活的降低。
反膠束體系能較好地模擬酶的天然環(huán)境,使得大多數(shù)酶能夠保持催化活性和穩(wěn)定性 反膠束體系主要應(yīng)用于脂肪酶的研究 大部分脂肪酶是水溶性酶,親脂性的底物在水中溶解度小,因此脂肪酶在水中活性較低 在反膠束體系中,脂肪酶分子穩(wěn)定地存在于核心水池中,底物則溶于有機(jī)溶劑或附著于表面活性劑膜上,其酶活大大高于在水中的活性。
3.2 膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜
自從1984年膠束電動(dòng)毛細(xì)管
在MEKC中,表面活性劑通過形成帶電膠束而起作用,用于MEKC的表面活性劑種類很多,除最常用的十二烷基磺酸鈉
微乳狀液是由不相混溶的油、水和表面活性劑自發(fā)形成的外觀均勻、透明、熱力學(xué)穩(wěn)定的液體。水包油型
3.3 膠束液相色譜
與MEKC相似,將表面活性劑加入HPLC的流動(dòng)相<有機(jī)流動(dòng)相>中,形成反膠束,用帶有反膠束的流動(dòng)相作為洗脫液的HPLC 被稱作膠束液相色譜(MLC)。膠束的存在提高了HPLC的分辨率,同時(shí)調(diào)整了溶質(zhì)離子的保留時(shí)間,因此MLC可以用來分析含有更多組分的藥物分子的混合物。
3.4 泡沫分離
泡沫分離技術(shù)是1945年發(fā)現(xiàn)的一種新的分離技術(shù),它是基于表面吸附原理而對(duì)表面活性物質(zhì)或能與表面活性物質(zhì)相結(jié)合的物質(zhì)進(jìn)行的分離。最初它只是用于礦物浮選和痕量物質(zhì)的分離、提取等。
近年來人們致力于用泡沫分離技術(shù)分離提取蛋白質(zhì),并將此技
術(shù)用于環(huán)保工業(yè)。泡沫分離必須具備兩個(gè)基本條件:首先,待分離的溶質(zhì)應(yīng)是表面活性物質(zhì),或者是可與表面活性物質(zhì)相結(jié)合的物質(zhì),它們均可在氣-液界面上吸附;其次,待分離的溶質(zhì)在分離過程中能借助氣泡與液相主體分離,并在塔頂富集。
當(dāng)待分離的溶質(zhì)不具有表面活性時(shí),就需要向溶液中加入一定的表面活性劑。常用于泡沫分離的表面活性劑為TWeen系列。泡沫分離技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于適合低濃度的分離回收,并且設(shè)備簡單、投資少、耗能小、操作方便。泡沫分離技術(shù)主要應(yīng)用于分離固體粒子和溶液中的離子、分子;用于處理工業(yè)廢水;回收和濃縮蛋白質(zhì)、表面活性劑等表面活性物質(zhì);分離全細(xì)胞等。
3.5 液膜分離
液膜分離是革取與反革取同時(shí)進(jìn)行,并自相耦合的分離過程。其分離原理是利用組分在膜內(nèi)的溶解、擴(kuò)散性質(zhì)差異或在液膜內(nèi)加入載體,利用組分與載體間可逆絡(luò)合反應(yīng)的選擇性不同來進(jìn)行分離。液膜可將與其不能互溶的液體分隔開來,使其中一側(cè)液體中的溶質(zhì)選擇性地透過液膜進(jìn)入另一側(cè),實(shí)現(xiàn)溶質(zhì)之間的分離。液膜主要有乳化液膜、支撐液膜、流動(dòng)液膜、整體液膜等幾類。液膜的膜相主要由膜溶劑、表面活性劑、流動(dòng)載體和膜增強(qiáng)劑等構(gòu)成。
表面活性劑的作用主要是穩(wěn)定油水分界面,另外對(duì)組分通過液膜的擴(kuò)散速率和乳液的破乳、油相回用等都有顯著影響。配制油膜應(yīng)用HLB值為3~6的油溶性表面活性劑,水膜則選用8~10范圍內(nèi)的水溶
性表面活性劑。研究和應(yīng)用較多的是失水山梨醇單油酸酯、蘭113A、聚胺衍生物、LMA-1等。
液膜技術(shù)在生物工程領(lǐng)域用于抗生素、有機(jī)酸、氨基酸的提取及酶的包封,有著其它方法無法比擬的優(yōu)點(diǎn)
3.6 細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)物的釋放
隨著基因重組技術(shù)和發(fā)酵工程的發(fā)展,用外源表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)目標(biāo)產(chǎn)物得到了廣泛的應(yīng)用。然而如何使目標(biāo)產(chǎn)物破膜而出,而又不破壞其活性是生物分離工程面臨的一個(gè)難題。有人比較了超聲波破壁法、滲透壓休克法和使用非離子型表面活性劑的化學(xué)處理法。結(jié)果表明使用表面活性劑的化學(xué)處理法效果較好,不僅操作簡便、重復(fù)性好、效率高,而且對(duì)重組蛋白活性的破壞性較小。在高分子表面活性劑的單元結(jié)構(gòu)中,親脂基團(tuán)和親水基團(tuán)的大小與其破膜活性有關(guān)。
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